2018 年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了兩位免疫學(xué)家，分別是美國的 James P Allison 和日本的本庶佑教授，以表彰他們的原創(chuàng)發(fā)現(xiàn)推動(dòng)了免疫學(xué)研究的進(jìn)程，促使了癌癥治療領(lǐng)域革命性新藥物的面世。
如今炙手可熱的 PD-1， CAR-T，TCR-T 技術(shù)等都要?dú)w功于這一偉大發(fā)現(xiàn)及其臨床應(yīng)用。如果你的工作也和免疫療法相關(guān)，是不是像小編一樣也有一丟丟自豪，感覺自己參與見證了人類疾病史上的一次飛躍呢？
無論名字多么 fancy 的療法，有沒有用還是得看它能否消滅腫瘤
細(xì)胞。在體外實(shí)驗(yàn)中，
抗體或經(jīng)改造的免疫細(xì)胞（效應(yīng)細(xì)胞）對(duì)腫瘤細(xì)胞（靶細(xì)胞）的殺傷是評(píng)估療法效價(jià)的不可缺少的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。多年來，科學(xué)家們已開發(fā)出了多種免疫細(xì)胞殺傷的檢測(cè)方法，小編總結(jié)如下：
這些方法原理不同，也各有利弊。比如許多實(shí)驗(yàn)室常用的乳酸脫氫酶 (LDH) 釋放法是通過檢測(cè)細(xì)胞裂解后釋放到
培養(yǎng)基中的 LDH 來反映細(xì)胞的殺傷程度的。然而免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中都含有 LDH，死亡后都會(huì)釋放到培養(yǎng)基中，因此酶標(biāo)儀的讀數(shù)無法特異性地區(qū)分出腫瘤細(xì)胞的死亡，結(jié)果容易受到死亡的免疫細(xì)胞的影響。另外，該方法需設(shè)置多組對(duì)照，如無釋放組（不加免疫細(xì)胞）和釋放組（加 Triton X-100 完全裂解）來確定和的 OD 值讀數(shù)。如果對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞鋪板密度不均勻，極易造成誤差，甚至出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組殺傷效率為負(fù)數(shù)的奇怪結(jié)果。
再比如 Luciferase 報(bào)告基因法，是將 Luciferase 的基因片段連接在與 T 細(xì)胞激活相關(guān)基因 (比如 IL-2 或 NFAT) 的啟動(dòng)子之后，通過 Luciferase 的表達(dá)來反映 T 細(xì)胞的激活程度。簡(jiǎn)言之是在分子水平檢測(cè) T 細(xì)胞的激活。做該實(shí)驗(yàn)需自行改造 T 細(xì)胞或購買改造好的 T 細(xì)胞系，不夠靈活，具有較大的局限性。
列表中的所有方法還有一個(gè)共同缺憾，就是看不到細(xì)胞。有圖才有有真相，細(xì)胞殺傷連個(gè)細(xì)胞的影子都沒有，光讓咱們相信這些數(shù)字，心里是不是有點(diǎn)虛？實(shí)驗(yàn)失敗了也很難找原因。另外每次實(shí)驗(yàn)只能測(cè)一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，想測(cè)多個(gè)時(shí)間點(diǎn)得鋪多塊板，想想就好累！
檢測(cè)免疫細(xì)胞殺傷有沒有既靠譜又簡(jiǎn)單的方法呢？誰說沒有呢？科技的發(fā)展日新月異，小編今天就給大家介紹一下做免疫細(xì)胞殺傷的*新方法：
Calcein AM 染色法
客服一
