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總膽固醇(TC)檢測(cè)試劑盒(COD-PAP雙試劑微板法)

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公司名稱:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 型 號(hào): 生產(chǎn)地址:中國(guó)大陸 已獲點(diǎn)擊:535 簡(jiǎn)單介紹: 總膽固醇(TC)檢測(cè)試劑盒(COD-PAP雙試劑微板法),又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等,血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結(jié)合的膽固醇酯,后者被CEH水解為游離膽固醇,后者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應(yīng),生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應(yīng))。
詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱:總膽固醇(TC)檢測(cè)試劑盒(COD-PAP雙試劑微板法)
規(guī)格:50T/100T
供應(yīng)商:遠(yuǎn)慕生物
分類:生化檢測(cè)
儲(chǔ)存方式:4℃,避光,12個(gè)月
產(chǎn)品用途:用于人或動(dòng)物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測(cè)定。
注意事項(xiàng):又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等,血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結(jié)合的膽固醇酯,后者被CEH水解為游離膽固醇,后者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,并產(chǎn)生過氧化氫,再經(jīng)過氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應(yīng),生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應(yīng))。酶標(biāo)儀在500~520nm處進(jìn)行比色測(cè)定。



試劑注意事項(xiàng):
①試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
②實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
⑤按說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。



總膽固醇(TC)檢測(cè)試劑盒(COD-PAP雙試劑微板法) 常見問題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍;
2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理;
3、洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng);
4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
7、嚴(yán)格按照說明書操作。


總膽固醇(TC)檢測(cè)試劑盒(COD-PAP雙試劑微板法) 操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50?l。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l,然后再加待測(cè)樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50?l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50?l,再加入顯色劑 B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50?l,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。



檢測(cè)試劑注意事項(xiàng):
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。




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