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總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP單試劑比色法)

點擊次數:518  發布時間:2019/5/29

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公司名稱:上海遠慕生物科技有限公司 型 號: 生產地址:中國大陸 已獲點擊:518 簡單介紹: 總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP單試劑比色法),又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯法等,血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結合的膽固醇酯,后者被CEH水解為游離膽固醇,后者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,并產生過氧化氫,再經過氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應,生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應)。
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產品名稱:總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP單試劑比色法)
規格:50T/100T
供應商:遠慕生物
分類:生化檢測
儲存方式:4℃,避光,12個月
產品用途:用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測定。
注意事項:又稱膽固醇氧化酶法或膽固醇氧化酶-過氧化物酶偶聯法等,血液中的膽固醇約1/3為游離膽固醇,2/3為與脂肪酸結合的膽固醇酯,后者被CEH水解為游離膽固醇,后者被膽固醇氧化酶(COD)氧化成膽甾烯酮,并產生過氧化氫,再經過氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林與酚(三者合稱PAP)反應,生成紅色醌亞胺色素(Trinder反應)。分光光度計在500~520nm處進行比色測定。



試劑注意事項:
①試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
②實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
③使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
④加入試劑的順序一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
⑤按說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。



總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP單試劑比色法) 常見問題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍;
2、加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理;
3、洗板時容易造成誤差: 因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動;
4、顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈;
7、嚴格按照說明書操作。


總膽固醇(TC)檢測試劑盒(COD-PAP單試劑比色法) 操作步驟:
1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50?l。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40?l,然后再加待測樣品 10?l。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50?l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50?l,再加入顯色劑 B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50?l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。



檢測試劑注意事項:
1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。




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原創作者:上海遠慕生物科技有限公司


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