詳細(xì)內(nèi)容

一、貨號：CR2639（50mL純化量）

二、試劑原理：

本試劑盒利用不同蛋白需要的沉淀試劑和沉淀?xiàng)l件不同，通過大量實(shí)驗(yàn)分析驗(yàn)證而得到的一個(gè)與傳統(tǒng)沉淀純化完全不同的精細(xì)的具有高活性、高產(chǎn)率、快速以及良好重復(fù)性的單克隆抗體的純化方法。

三、試劑特點(diǎn)：

本試劑盒特點(diǎn)在于純化操作的簡單化、所得抗體的高活性和高純度。實(shí)驗(yàn)表明，本試劑盒可以得到90%左右純度的抗體；并且由于配方考究，抗體在純化過程中幾乎沒有損傷，完全保持應(yīng)有的活性，實(shí)際應(yīng)用好。

四、適用范圍：

本試劑盒適用于小鼠IgG1和2亞類單克隆抗體腹水的純化，不能用于IgM和IgA類和其它IgG亞類的單克隆抗體腹水的純化實(shí)驗(yàn)。

五、試劑組成：

六、純化步驟：

1、將單克隆抗體腹水從冰箱中取出，室溫避光放置15分鐘，然后用涼水邊沖邊搖勻快速解凍。

2、將化開的單克隆抗體腹水12000RPM 室溫離心10-20分鐘。

3、先吸棄上面浮沫和油脂，然后將上清轉(zhuǎn)出到另一個(gè)干凈容器或離心管；按每1毫升單克隆抗體腹水加入純化液A 1毫升，室溫避光倒轉(zhuǎn)20分。

4、8000-12000RPM 室溫離心10-20分鐘，沉淀用純化液B溶解到原單克隆抗體腹水1/2體積；再按每毫升加入純化液C 1毫升，室溫避光倒轉(zhuǎn)10分鐘。

5、8000-12000RPM 室溫離心10-20分鐘，棄沉淀收集上清；每1毫升上清液加純化液D  1毫升，室溫避光倒轉(zhuǎn)20分鐘。

6、8000-12000RPM 室溫離心10-20分鐘，收集沉淀用純化液B收集溶解沉淀到原單克隆抗體腹水體積的1/2。

7、透析袋用PBST浸泡3-5分鐘，然后用手揉捏數(shù)次，自來水沖凈后接純水沖洗干凈，將純化好的抗體放入用透析夾或繩扎緊。

8、透析試劑用純水溶解配成透析液，將要透析的抗體袋子放入。抗體體積：透析液體積=1:50，4℃攪拌透析每次0.5-1小時(shí)，共3-4次。

9、8000-12000RPM 室溫離心10-20分鐘，收集上清測蛋白濃度后加10/萬NaN3防腐并除菌過濾加50%甘油冷凍在-20℃存放保存。

七、 注意事項(xiàng)：

1、本試劑對未溶血的小鼠多抗血清的純化也有比較好的效果，但不建議您這樣做，因?yàn)槿苎�的抗血清純化效果欠佳�?/font>

2、離心溫度不能超過37℃。

3、操作和量取試劑要細(xì)致精準(zhǔn)。

4、溶血嚴(yán)重和腐敗的腹水不得用于純化。

5、不攪拌透析每次時(shí)間不得低于2小時(shí)。 

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

標(biāo)簽：小鼠IgG1和2亞類單抗（僅支持腹水中IgG1/2單抗）純化試劑盒   

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