詳細內(nèi)容

產(chǎn)品名稱：HRP-兔抗人IgG(H+L)

緩沖液成分：50%甘油、0.01M PBS、0.5%RSA、Proclin-300

標記物濃度：2mg/mL左右

使用建議：ELISA建議在1:4000-20000，WB建議在1：4000-12000，IHC建議在1:500-2500選擇合適您實驗的稀釋比例，也可根據(jù)您實驗的具體情況在此建議的稀釋度范圍之外合理使用,如果您使用得當(dāng)本產(chǎn)品可以稀釋到數(shù)萬倍后仍具有使用價值。稀釋液推薦使用含0.2% BSA和0.05% 吐溫-20的0.01M的PBS（PH：7.0），也可使用其它正確的稀釋液，原則上配成的工作液要一次使用完，稀釋后若需長期存放多次使用，請聯(lián)系我們購買穩(wěn)定劑或者商品化稀釋液。

儲存方法：請避光存放在-20℃。

有效期限：請查看管體標簽，請您在管體注明有效期內(nèi)使用。

注意事項：雖然本試劑在有效期過后很長一段時間仍可以使用，但還是強烈建議您在管體規(guī)定的有效期內(nèi)正確使用。請不要在臟亂和強光環(huán)境中取用，以免造成污染和失效。如果一次使用很少可以將其適當(dāng)分裝后使用，這樣可以有效的防止試劑因為頻繁使用而造成污染。 請使用正確的稀釋液，沒有酶免基礎(chǔ)知識的人員不得利用本產(chǎn)品做任何實驗否則可能得到錯誤結(jié)果 。此外本試劑僅用于科學(xué)研究不能直接用于診斷。


產(chǎn)品功能：
抗體的主要功能是與抗原（包括外來的和自身的）相結(jié)合，從而有效地清除侵入機體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物，抗體（antibody）是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活，也可能無效但有時也會對機體造成病理性損害，如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生，對人體可造成危害。


操作流程:
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：
1. 包被：用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔 中,置37℃孵育1小時,洗滌。
同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml， 37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司

標簽：HRP-兔抗人IgG(H+L)   

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