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巨噬細(xì)胞研究指南:如何選擇標(biāo)志物
閱讀次數(shù):1813 發(fā)布時間:2020/11/13 10:16:48
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巨噬細(xì)胞(Macrophage)是分布廣泛的白細(xì)胞,存在于人體的多種組織中。作為單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中的一部分,巨噬細(xì)胞的作用是吞噬死細(xì)胞、細(xì)胞碎片、病原體及其他外來物。此外,它們還具有信號傳導(dǎo)和調(diào)節(jié)功能,參與了許多生物學(xué)過程,比如免疫、發(fā)育、修復(fù)、穩(wěn)態(tài)和癌癥。

考慮到巨噬細(xì)胞亦正亦邪,在各種生物環(huán)境中發(fā)揮復(fù)雜的作用,研究人員一直在探索它們的豐度和功能。這份指南概括了巨噬細(xì)胞表達(dá)的基因,以及適用于檢測的免疫學(xué)工具。靶向這些蛋白質(zhì)不僅可鑒定巨噬細(xì)胞的亞型,還有助于研究相關(guān)的通路或疾病狀態(tài)。

除了在各種組織中發(fā)揮特定作用,巨噬細(xì)胞還具有很高的可塑性,能夠響應(yīng)環(huán)境信號而改變其表型。這使得巨噬細(xì)胞形成完全不同的亞群,每個亞群有不同的基因表達(dá)譜和細(xì)胞功能。為了更好地了解這些差異,我們在此對各種蛋白標(biāo)志物進(jìn)行分類。

單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化中的標(biāo)志物

巨噬細(xì)胞的來源是個復(fù)雜的問題。小鼠研究表明,巨噬細(xì)胞或源于胚胎前體細(xì)胞,或源于骨髓來源的單核細(xì)胞。在血液中循環(huán)的單核細(xì)胞遷移到組織,形成組織駐留巨噬細(xì)胞(TRM)。這種密切相關(guān)的細(xì)胞類型有效地補(bǔ)充了組織中的巨噬細(xì)胞。為了區(qū)分巨噬細(xì)胞及其前體,人們通常檢測一組細(xì)胞表面標(biāo)志物及其差異表達(dá)水平。

檢測單核細(xì)胞譜系標(biāo)志物的抗體包括:Ly6c1抗體、F4/80抗體、ITGAM/CD11b抗體、CD68抗體、FCGR3A/CD16抗體、CD14抗體

組織駐留巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物

巨噬細(xì)胞駐留在不同組織中,從而產(chǎn)生了執(zhí)行不同功能的細(xì)胞群體。小鼠的研究表明,巨噬細(xì)胞的表型和功能是由它們在組織微環(huán)境中收到的信號所決定的。除了作為抵御病原體入侵的道防線之外,駐留的巨噬細(xì)胞在維持組織完整性和組織穩(wěn)態(tài)方面也發(fā)揮著重要作用。

例如,人們發(fā)現(xiàn)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)育的巨噬細(xì)胞(小膠質(zhì)細(xì)胞)有多種功能,包括清除碎片、重塑突觸連接以及免疫監(jiān)視。在脂肪組織中,與脂肪相關(guān)的巨噬細(xì)胞參與信號傳導(dǎo),調(diào)節(jié)胰島素敏感性。肺泡巨噬細(xì)胞攻擊吸入的異物,并通過吞噬作用清除過量的肺表面活性物質(zhì)。肝臟中的巨噬細(xì)胞(即Kupffer細(xì)胞)可清除血液中的微生物、紅細(xì)胞及其他細(xì)胞碎片。骨髓巨噬細(xì)胞可促進(jìn)紅細(xì)胞的造血作用。脾臟中的巨噬細(xì)胞參與免疫監(jiān)視、鐵代謝和細(xì)胞清除等活動。

M1和M2極化的標(biāo)志物

在適當(dāng)?shù)拇碳は拢奘杉?xì)胞被激活成不同的炎癥狀態(tài),包括M1(經(jīng)典激活)和M2(選擇性激活)兩類。M1巨噬細(xì)胞具有促炎作用,與細(xì)菌及細(xì)胞內(nèi)病原體的免疫反應(yīng)相關(guān)。相反,M2具有抗炎作用,在血管生成和傷口愈合中發(fā)揮功能。M2也與輔助性T細(xì)胞2(Th2)反應(yīng)相關(guān),如抗蠕蟲免疫力、哮喘和過敏。

M1型巨噬細(xì)胞的激活是通過IFNG、TNF和Toll樣受體(TLR)的信號傳導(dǎo)而發(fā)生的。與M1極化相關(guān)的遺傳標(biāo)志物包括IL1a、IL1b、IL6、NOS2、TLR2、TLR4、CD80和CD86。對于M2型巨噬細(xì)胞,激活是通過IL4、IL10和IL13等細(xì)胞因子。M2標(biāo)志物包括CD115、CD206、PPARG、ARG1、CD163、CD301、Dectin-1、PDL2和Fizz1。值得注意的是,M1和M2表型是連續(xù)的,因此處于中間范圍的巨噬細(xì)胞可以同時表達(dá)一些標(biāo)志物。

檢測M1標(biāo)志物的抗體包括:IL1B抗體、NOS2抗體、TLR2抗體、CD86抗體;檢測M2標(biāo)志物的抗體包括:CSF1R/CD115抗體、MRC1/CD206抗體、ARG1抗體、CD163抗體

腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物

人們發(fā)現(xiàn),癌細(xì)胞也可以利用巨噬細(xì)胞來促進(jìn)癌癥發(fā)展。對于多種類型的癌癥,腫瘤部位巨噬細(xì)胞的密度增加與患者存活率低存在關(guān)聯(lián)。小鼠研究也發(fā)現(xiàn),腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAM)可刺激腫瘤血管生成,協(xié)助腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲,并抑制腫瘤免疫力。

這些結(jié)果的出現(xiàn)可歸因于癌細(xì)胞信號傳導(dǎo)影響了巨噬細(xì)胞功能,以及TAM自身產(chǎn)生的蛋白質(zhì)促進(jìn)腫瘤生長。癌癥生物學(xué)本身就很復(fù)雜,同樣,TAM也可以采用不同的基因表達(dá)譜。文獻(xiàn)中提到的一些TAM標(biāo)志物包括CCR2、CSF1R、MARCO、PDL2、CD40、CCL2、CSF1、CD16和PDGF beta。巨噬細(xì)胞之間的相互關(guān)系仍然是癌癥研究和藥物開發(fā)中的活躍領(lǐng)域。

檢測TAM標(biāo)志物的抗體:CCR2抗體、PDL2抗體、CD40抗體、CCL2抗體、PDGFB抗體
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