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公司新聞

怎么去除細胞上的支原體?
閱讀次數:657 發布時間:2020/9/16 9:59:22
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細胞培養*怕支原體污染,但有一些被污染的細胞不能被丟棄時該怎么辦?今天小編把一個小絕招教給你,簡單有效!

如何祛除細胞上的支原體污染?

據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。支原體直徑約180~350nm,比細胞小很多,經低速離心與細胞分離。通過反復懸浮沖洗、離心,加上使用我們的Zell Shield?,即可在細胞培養四代以內有效地祛除支原體。

什么是Zell Shield??

Zell Shield?是一種鏈青霉素類復合抗生素,對細胞影響很小,可以有效抑制細胞培養中的支原體、細菌、霉菌、真菌等微生物增殖。普通的鏈霉素、青霉素對支原體沒有效果。


具體是怎么操作呢?

1.首先把被支原體污染的細胞消化下來,放入離心管離心,棄上清。再加入干凈的PBS懸浮沖洗細胞、低速離心(300~500r/min)、棄上清,反復三次。這樣可祛除細胞表面60%~70%的支原體,支原體還剩約30%~40%.

2.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,傳代培養。這時因培養基中Zell Shield?的抑制作用細胞培養過程中,雖然細胞增殖,但殘留的支原體無法增殖。細胞需再次傳代時,把第二代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復三次,這時,細胞上殘留的支原體大約已剩余為*初污染量的10%左右。

3.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,傳代培養。需再次傳代時把第三代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復三次,可再次祛除60%~70%的殘余支原體,通過沖洗、抑制、換液等操作,細胞中支原體的殘留污染量大約只剩3%左右。

4.細胞加入含1%Zell Shield?的新鮮培養基,

傳代培養。

需再次傳代時把第四代細胞消化下來,離心,棄上清。加入新鮮PBS懸浮沖洗、再離心、棄上清,反復三次,可再次祛除60%~70%的支原體,此時,支原體殘留量大約已低于1%.支原體的增殖亦有密度要求,用Zell Shield?處理過四代的細胞,即便撤掉Zell Shield?,只要保證沒有新的支原體人為再次帶入,原有支原體也無法再增殖,隨著傳代,換液,支原體的老化、死亡,細胞中的支原體污染基本就徹底解決了。

敲黑板,劃重點啦


1.每次傳代時,重復三次對細胞懸浮沖洗步驟非常重要,操作要正確、規范,以達*佳效果!

2.在培養基中加入1%Zell Shield?抑制支原體增殖!

3.使用安全的血清、培養基等試劑,不再有新的支原體加入!

做到以上三點即可確保祛除支原體污染。

Zell Shield?工作原理是什么?

支原體祛除劑Zell Shield?(培養基用)是一種即用型鏈青霉素類的復合抗生素,在培養基中1%的濃度通過阻止原核生物DNA及蛋白的合成,抑制細胞培養中遇到的細菌、真菌、霉菌增殖,更可以有效、精確地抑制支原體增殖,且對細胞基本安全。

品名:支原體祛除劑Zell Shield?(培養基用)

規格:50mL/瓶

儲存溫度:-18℃
使用注意事項:實驗室初次使用,注意分裝,分裝后的小包裝Zell Shield?仍-20℃避光冷凍保存,現配現用。
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