⑴將一管
細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
⑵用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
⑶將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉,直到管內物體完全融化。
⑷將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉入無菌環境。
⑸用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
⑹打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內容物。
⑺平衡管內物,用多聚賴氨酸包被培養瓶(多數細胞用T-75的培養瓶)。多數細胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細胞。
⑻蓋好蓋子,輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
⑼將培養瓶放放培養箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
⑽植入培養后第6-16小時更換一次
培養基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
生物試劑的使用常識:
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特性)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對不允許用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(怕產生原試劑的再次污染)。
處理提示:
1、購買后,請務必確認標簽上的注意事項。
2、做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制。
3、在使用前再次確認標簽上的注意事項。做好必要的安全對策。
4、對沒有標明其危險特性,有害特性的,也要慎重地進行操作。
5、必須戴好防護用具,小心翼翼進行操作。
6、請參照相關法規,文獻,MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
7、通常購買試劑時要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話,要更加注意其保管和管理。
8、萬一試劑操作者并非專業技術人員。必須在專業人士的指導監督下進行操作。
9、對于使用后的廢棄物,不要或舊的試劑,應按照相關法律法規正當處理。