現(xiàn)在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中抗凝劑的應(yīng)用越來越多，如何正確的應(yīng)用抗凝劑，程度的發(fā)揮抗凝劑的作用，同時(shí)盡量減少其不利影響應(yīng)該得到大家的重視。現(xiàn)在就對(duì)抗凝劑的種類與應(yīng)用時(shí)的注意事項(xiàng)作淺要的分析。
應(yīng)用物理或化學(xué)方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，稱為抗凝。能夠阻止血液凝固的
化學(xué)試劑或物質(zhì)，稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。對(duì)抗凝劑的一般要求是用量少、溶解度大、不影響測定。常用抗凝劑的種類與應(yīng)用。
1 乙二胺四乙酸鹽
EDTA是臨檢工作中*常用和*重要的抗凝劑和試劑，其機(jī)制是通過與水相中的鈣離子形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的鹽類有鉀、鈉、鋰鹽、均溶于水，鉀鹽較鈉鹽的溶解度大，EDTA鹽對(duì)紅、白
細(xì)胞形態(tài)影響很小，根據(jù)血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)公委員會(huì)（International committee standard of hematology,ICSH）1993年文件建議，血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑，EDTA-NA與EDTA-K2對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)影響均較小，但二鈉溶解度明顯低于二鉀，有時(shí)影響抗凝效果，其他抗凝劑不適合于血細(xì)胞計(jì)數(shù)。
EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子，故不適于制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細(xì)胞的血涂片。EDTA還會(huì)影響血小板聚集和白細(xì)胞吞噬功能，也不適于做止血學(xué)檢驗(yàn)和血小板功能檢驗(yàn)。用EDTA抗凝血制備的涂片對(duì)粒細(xì)胞形態(tài)有影響，其影響程度與抗凝血放置時(shí)間和抗凝劑濃度有關(guān)。用大于1.5g/L血液濃度制備的血涂片，粒細(xì)胞可完全變性，對(duì)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞也有影響，尤其是血小板，可出現(xiàn)腫脹、破裂而產(chǎn)生碎片，影響其計(jì)數(shù)，造成結(jié)果偏高。隨著臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展，近年來糖化血紅
蛋白檢測項(xiàng)目的開展，也使用了EDTA-K2作為抗凝劑，從而減少了對(duì)結(jié)果的影響。
雙草酸鹽抗凝劑常用有草酸鈉、草酸鉀、草酸銨，溶解后解離的草酸根離子能與樣本中鈣離子形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血作用，阻止血液凝固。但不適于凝血檢查。而且，草酸鹽濃度過高還會(huì)導(dǎo)致溶血、改變血液pH，干擾血漿鉀、鈉、氯和某些酶活性的測定。雙草酸鹽抗凝劑：適用于血細(xì)胞比積、血細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等檢查，不適于血小板計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。
草酸鉀 常用于供檢驗(yàn)用血液樣品的抗凝。供鉀、鈣含量測定的血樣不能用草酸鉀抗凝。
2 草酸鉀－氟化鈉
草酸鉀可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大，抗凝作用強(qiáng)。氟離子能結(jié)合鈣而抗凝，但抗凝效果較弱。氟離子可抑制糖酵解中的烯醇化酶，防止糖酵解，若未加氟化鈉，血標(biāo)本中葡萄糖檢驗(yàn)地 帶網(wǎng)含量將以每小時(shí)6％的速度下降。而在氟化鈉的存在下，血糖濃度在25℃可穩(wěn)定24小時(shí)，4℃可穩(wěn)定48小時(shí)。因此，草酸鉀－氟化鈉是血糖測定標(biāo)本常使用的抗凝劑。
3 肝素
肝素是血液化學(xué)成分測定中的抗凝劑。肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和暑堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖。其抗凝機(jī)制是與抗凝酶Ⅱ一起，在低濃度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，并能加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶，從而阻止凝血酶形成；還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X，阻止血小板聚集的作用。盡管肝素可以保持紅細(xì)胞的自然形態(tài)，但由于其常可引起白細(xì)胞聚集，使血涂片在羅氏染色時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景，因此肝素抗凝血不適全血液學(xué)一般檢查。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑。
因?yàn)楦嗡剽c能增加血漿鈉的含量，而肝素銨能增加尿素氨的含量。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血漿中有明顯的區(qū)別。在凝血過程中由于紅細(xì)胞的溶解破壞使血清鉀的含量比血漿為高，由于血漿中含有纖維蛋白原，其含量比血清高。因此，測定鉀離子時(shí)，注意血清與血漿之間的差異。 血漿中的總蛋白質(zhì)量是包含了纖維蛋白原在內(nèi)的所有蛋白質(zhì)，而血清中是不含有纖維蛋白原的總蛋白質(zhì)含量，理論上應(yīng)該低于血漿中的總蛋白含量。因此在進(jìn)行血液總蛋白質(zhì)含量測定時(shí)，以血清為標(biāo)本，對(duì)一些急診標(biāo)本，或是一些因其他原因急需測定的患者，需要用血漿做標(biāo)本測定總蛋白時(shí)，在測出總蛋白后，應(yīng)扣除纖維蛋白原的含量（一般扣除3%～5%），這樣才能與以血清為標(biāo)本測得的總蛋白含量一致，真實(shí)反映患者體內(nèi)實(shí)際總蛋白質(zhì)之含量。
4 枸椽酸鈉
枸椽酸鈉 枸椽酸鹽其抗凝機(jī)制是枸椽酸鹽與可與血中鈣離子形成可溶性螯合物，從而阻止血液凝固。枸椽鈉對(duì)凝血V因子有較好的保護(hù)作用，使其活性減低緩，故常用于凝血象的檢查，也用于紅細(xì)胞沉降率的測定。因毒性小，是輸積壓保養(yǎng)中的成分。
枸櫞酸鹽其鹽類主要是鈉鹽。對(duì)于用于監(jiān)測口服華法令等抗凝劑治療的患者，測定PT、APTT所用的枸緣酸鈉濃度（3.2%或3.8%）不應(yīng)隨意改變，因?yàn)榭赡苡绊懙綐?biāo)準(zhǔn)化比值（INR）。一般用濃度0.129mol/L的枸緣酸鈉比用0.109mol/L濃度時(shí)INP值要高些，另外對(duì)不同來源的凝血活酶試劑，對(duì)同一正常人或患者血漿的凝固時(shí)間可以相差很大。因此每個(gè)實(shí)驗(yàn)室所使用的凝血活酶試劑的來源應(yīng)盡可能恒定，配制操作方法應(yīng)規(guī)范化，否則會(huì)使凝固時(shí)間延長或縮短，或使正常值無規(guī)律性。有條件的實(shí)驗(yàn)室可采用緩沖抗凝劑，這種試劑對(duì)標(biāo)本經(jīng)冷凍保存后再進(jìn)行分析更為適宜。緩沖劑的作用是維持血漿恒定pH值，防止易變因子失活。
綜上所述，抗凝劑的種類及對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響已非常清楚，遠(yuǎn)慕提醒大家在今后的工作中多加注意。
客服一
