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技術(shù)文獻(xiàn)

應(yīng)對菌落蔓延，TTC的使用方法！
閱讀次數(shù)：1633 發(fā)布時間：2021/7/30 10:07:12

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關(guān)于TTC的使用，從剛開始的菌落蔓延，搜索解決辦法，了解TTC之后琢磨使用劑量，可以說是花了一段不短的時間。包括對于TTC的使用，也可以說“眾說紛紜”，好了，廢話說到這，進(jìn)入正題：

先，TTC有毒，不僅毒細(xì)菌也毒人，所以使用的時候要小心（其實(shí)用別的化學(xué)試劑也要小心，不好意思，又說廢話了）。接著是配置的0.5%的TTC溶液，你們可以根據(jù)個人的需要配置不同濃度。

配置方法：實(shí)驗(yàn)室用水（我們用的桶裝純凈水）200mL，TTC粉末1.00 g，水不用滅菌，稍微加熱（大概40℃水溫這樣就完-全溶解了），也可以攪拌至完-全溶解，然后倒入棕色瓶子，放無菌室靜置大概72小時（放置72小時，不確定24小時或者48小時行不行），此時配置出來的溶液加入空白培養(yǎng)基是養(yǎng)不成菌落的（我覺得這也說明了這東西有毒）。沒必要先把水滅菌，也沒必要加入PDA培養(yǎng)基里一起121℃滅菌。

使用劑量：一般是500mL PDA培養(yǎng)基配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液，在無菌室里操作，在倒平板之加，搖晃均勻就可以，對解決菌落蔓延問題非常有效，而且也不會有明顯的抑制細(xì)菌生長導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確的情況。

溫馨提醒：放置條件：避光低溫保存。

小結(jié)
目的 : 為便于區(qū)別樣品顆粒與菌落，可在每 100mL 瓊脂培養(yǎng)基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色。
配制 : TTC 0.5g，蒸餾水 100mL，溶解。定性濾紙過濾，濾液置于棕色瓶中，4°C冰箱冷藏。
滅菌 : 配好的0.5% TTC，過濾除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按預(yù)計(jì)使用量分裝入小管，115℃高壓滅菌 20min 、121度高溫滅菌15min，過后4°C冰箱冷藏。
使用 : 臨澆平板，再按述比例將TTC與培養(yǎng)基混合搖勻。

原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司