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技術(shù)文獻(xiàn)

簡(jiǎn)述影響細(xì)胞生長(zhǎng)的各種因素
閱讀次數(shù):1803 發(fā)布時(shí)間:2021/3/11 9:25:18
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哺乳動(dòng)物及人源細(xì)胞培養(yǎng)的適溫度為35-37V,對(duì)低溫耐受力比高溫強(qiáng)。39℃以上的培養(yǎng)環(huán)境細(xì)胞容易受損,甚至死亡。不低于0℃時(shí)((0-34℃),細(xì)胞能生存,但代謝降低、分裂延緩。

(二)氣體環(huán)境和pH

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要O2和CO2。O2通量過(guò)大對(duì)細(xì)胞有毒害,般使用空氣中的O2含量就可以。CO2則與維持培養(yǎng)基的pH有關(guān),細(xì)胞培養(yǎng)的佳pH為7.2-7.4,通過(guò)緩沖系統(tǒng)和調(diào)節(jié)CO2含量,可維持正常pH。

開(kāi)放培養(yǎng)要求5%CO2環(huán)境、HEPES(羥乙基哌嗪乙硫磺酸)10-50mmol/ml可防止培養(yǎng)基的pH變化。含Earle's緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)基適合于5%CO2的培養(yǎng)條件,Hank's緩沖系統(tǒng)的培養(yǎng)基僅含有0.35g/LNaHCO3,不能用于5%CO2的環(huán)境,若放入CO2培養(yǎng)箱,溶液將迅速變酸,使用時(shí)應(yīng)注意。

(三)濕度和光

利用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板、方瓶、培養(yǎng)皿等開(kāi)放培養(yǎng)時(shí),相對(duì)濕度應(yīng)控制在95%以上。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需避光,紫外線或可見(jiàn)光均可造成核黃素、酪氨酸、色氨酸等產(chǎn)生有毒的光產(chǎn)物,抑制細(xì)胞生長(zhǎng),降低其貼壁能力。

(四)影響細(xì)胞生長(zhǎng)的其他因素

細(xì)胞接觸橡膠用品,收集細(xì)胞時(shí)離心速度過(guò)大,細(xì)胞接種密度過(guò)低,細(xì)胞懸液或細(xì)胞培養(yǎng)物中氣泡形成等,均對(duì)細(xì)胞不利,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡或生長(zhǎng)繁殖抑制。

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