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技術(shù)文獻(xiàn)

捕獲法測(cè)定IgM抗體的基本操作步驟
閱讀次數(shù):1378 發(fā)布時(shí)間:2023/5/30 10:23:57
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血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在,后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。

操作步驟如下:

⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。

⑵加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。

⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。

⑷加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。

⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,是為陽(yáng)性反應(yīng)。

血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在,后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。

操作步驟如下:

⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。

⑵加入稀釋的血清標(biāo)本:保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。

⑶加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。

⑷加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。

⑸加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在,是為陽(yáng)性反應(yīng)。


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