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技術文獻

PCR污染被揭露,為XMRV的爭論火上澆油
閱讀次數:1785 發布時間:2019/10/30 10:32:28
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異養性小鼠白血病相關病毒 (XMRV) 與慢性疲勞綜合征 (CFS)、一種病因不明的衰弱狀態以及前列腺癌有關。這些關聯引發了激烈的爭論,隨后的研究要么支持要么質疑這種關聯。

然而,大多數研究,無論是支持還是否定 XMRV 與這兩種疾病之間的聯xi,都嚴重依賴PCR檢測提供的證據。因此,當逆轉錄病毒學在 2010 年 12 月發表了四篇研究文章,揭示了與 XMRV PCR 分析相關的潛在污染問題時,極大地影響了先前研究的有效性。所有四項研究都表明,老鼠的遺傳物質會污染實驗,導致假陽性結果。

Robinson 等通過對 437 份人體組織樣本的 PCR 檢測表明,雖然在前列腺癌患者中檢測到了 XMRV 基因序列,但也檢測到了其他小鼠基因序列。奧克斯和他的同事證實,來自 CFS 患者的 XMRV 陽性血液樣本對小鼠線粒體 DNA 檢測呈陽性。此外,兩項研究都表明,健康患者的樣本對 XMRV 和小鼠線粒體 DNA 均呈陽性。據認為,這些研究中使用的血液和組織樣本在 PCR 分析之前已被小鼠 DNA 污染。
 



正如 Sato 等人報告的,在 PCR 過程中也可能發生污染,他們在實際的 PCR 試劑中,即從 Invitrogen 公司提供的 RT-PCR 試劑盒中檢測到 MLV-編碼核酸。這種污染會導致對 XMRV 的錯誤檢測。因此,在他們的結論中,作者敦促在研究中使用 PCR 試劑盒之前謹慎評估,以消除假陽性結果的風險。

XMRV 的 PCR 檢測目標是 24 -nt gag-leader 的缺失,但是 Hue 等人在他們的研究文章中指出,這種缺失并不是 XMRV 獨有的,針對這種缺失的引物擴增了在實驗室中使用的 12 種不同鼠株和 5 種腫瘤細胞系中發現的 MLV 序列。順化等人從包括系統發育分析在內的多管齊下的調查中得出結論,XMRV 不是一種真正的人類病原體。

這些*近發表的文章對以前的研究結果提出了嚴重的質疑,這些研究結果聲稱證明了 XMRV 和 CFS 或前列腺癌之間存在聯系,并規定在未來的調查中要考慮和考慮這些污染源,以使新發現可信。

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