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技術文獻

小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒操作說明書
閱讀次數:1995 發布時間:2017/11/17 9:56:56
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    上海遠慕生物科技公司是國內elisa試劑盒優質供應商,代理銷售不同ELISA試劑盒品牌的進口/國產elisa試劑盒,專業供應科研實驗所需的培養基,抗體,動物血清血漿,標準品對照品" >標準品對照品化學試劑,酶聯免疫試劑盒,白介素試劑盒,金標檢測試劑盒,微生物,蛋白質,ELISA種屬涵蓋廣,憑借多年行業經驗,完善的售后服務,高質量的產品。歡迎來電咨詢。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒操作說明書產品簡介:

    中文名:小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒

    別名:小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA kit

    供應商:上海遠慕

    規格:48t/96t

    保存:2-8℃

    有效期:6個月

    庫存狀態:現貨供應。

    保 存:2-8℃,避光保存。

    適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床。

    性能:敏感性高,特異性強,重復性。

    ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。

    試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒液體類標本:

    包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

    1)血清:

    室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

    2)血漿:

    應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

    3)尿液:

    用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

    4)細胞培養上清:

    檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

    5)組織標本:

    切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒操作流程:

    1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒注意事項:

    1.標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底加深。

    2.凍結標本溶解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混合,不要在混勻器上強烈震蕩。

    3.渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。

    4.反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒組織結構:

    1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

    2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

    3、 細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

    4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。

    5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA檢測試劑盒操作說明書 包含以下各組分:

    (1)結合物及標本的稀釋液;

    (2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;

    (3)酶標記的抗原或抗體(結合物);

    (4)酶的底物;

    (5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),ELISA試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中);

    (6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

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