技術文獻
中文名：植物赤霉素（GA）elisa試劑盒
別名：植物赤霉素（GA）ELISA Kit
供應商：上海遠慕
規格：48t/96t
保存：2-8℃低溫保存
有效期：6個月
適用范圍：僅限科研實驗，不作臨床使用。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。
特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養上清或其它相關生物液體中的含量。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：
①標本因素；
②試劑因素；
③操作因素。
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒試劑組成
植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒若干特點：
專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
靈敏度高：由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒液體類標本要求：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
1）血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/ 分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5）組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒包含以下各組分：
（1）結合物及標本的稀釋液；
（2）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；
（3）酶標記的抗原或抗體（結合物）；
（4）酶的底物；
（5）陰性對照品和陽性對照品（定性測定中），ELISA試劑盒參考標準品和控制血清（定量測定中）；
（6）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒操作流程：
1，試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。
2，實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3，不用的其它試劑應包裝好或蓋好。
4，使用一次性的吸頭以免交叉污染，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5，使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6，洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
8，嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明書為主。
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒預期應用注意事項：
1.不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同，務必按照所用試劑盒嚴格操作，否則容易產生檢測結果的不確定性。
2.若不同批號EILSA試劑盒的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現顯色淺或本底高，花板等情形。
3.反應時間的誤差，做大量標本時，孔和*后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
4.臨界值附近標本波動為正常現象，任何試劑均不可避免�？梢钥紤]將標本做奇數次復檢。
5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響極大，建議校對加樣器。
植物赤霉素（GA）ELISA檢測試劑盒實驗方法：
1、加入待測標本每孔0.05ml，并設HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照1孔，然后加入酶結合物每孔1滴（0.05ml、空白對照孔不加），充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板：棄去反應條孔內液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復五次后拍干。
3、顯色劑：先加顯色劑A每孔1滴（0.05ml），然后再加顯色劑B每孔1滴（0.05ml），混勻，37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴（0.05ml），混勻。
注意事項：
1、試劑盒置2℃～8℃保存。
2、使用前試劑應搖勻，并棄去1～2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環境中取出試劑盒內全部瓶裝試劑及待測標本所需微孔條，置室溫平衡30分鐘后再行測試，余者應及時封存于冰箱中以備后用。
植物赤霉素（GA）ELISA試劑盒標本采集及保存：
1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；
2、 加進樣品體積3倍的提取液（10% TCA）， 置于-20 過夜；
3、 請于4 ，8000rpm，離心1小時，棄上清，收集沉淀；
4、 沉淀加進等體積的冰浴丙酮，混勻后于4 離心（8000rpm，15分鐘），棄上清并真空干燥，保存備用；
5、 上樣前加進裂解液（2.7g 尿素，0.2g CHAPS，溶于往離子水中至終體積5ml），混勻后室溫放置30分鐘，然后4 離心（8000rpm，15分鐘），取上清并暫時保存于4 待用。
注：以上標本均應密封保存，4 保存應小于1周，-20 不應超過1個月，-80 不應超過2個月
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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