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技術文獻

豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒說明書
閱讀次數:1735 發布時間:2017/8/14 16:49:44
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上海遠慕生物科技詳細為您講述豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)elisa試劑盒說明書,規格型號,價格,品牌,優點等資訊,本司專業經營進口/國產ELISA試劑盒培養基,抗體,動物血清,標準品,蛋白質,實驗耗材,化學試劑,染色液,其他科研試劑,提供免費代測服務,一周出結果,所出售的ELISA試劑盒種屬涵蓋有大鼠,小鼠,豚鼠,人,羊,牛,雞,兔,豬,狗,植物,魚,駱駝及其他動物,了解更多種屬請來電!



中文名:豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
別名:豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit
供應商:上海遠慕
規格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產品用途:用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒說明書
本司ELISA試劑盒優點:
1.特異性強:不與其它細胞因子反應。
2.重復性好:板內、板間變異系數均小于10%。
3.穩定性高:實驗效果很穩定。
4.超靈敏度:*小的檢測濃度小于1號標準品,稀釋度和樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。



檢測原理:
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹 底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。




豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒組成:
1、包被抗-HBs反應條 1瓶
2、酶結合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4、HBsAg陰性對照 1瓶
5、洗滌液:用前每瓶作1:20稀釋 1瓶
6、顯色劑(TMB)A 1瓶
7、顯色劑(TMB)B 1瓶
8、終止液 1瓶



豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒說明書操作方法:
1、加入待測標本每孔0.05ml,并設HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然后加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應條孔內液體、拍干、用洗滌液注滿每孔,棄去拍干,反復五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml),然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml),混勻。


ELISA試劑盒結果:
比色法:波長450nm,先用空白孔校零點,然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性,否則為陰性。
備注:陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算,高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8,實驗結果有效。


豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒說明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中,英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。

豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA檢測試劑盒
 
豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒說明書液體類標本:

包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細胞培養上清等。
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水,腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

5. 培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。


豬內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA Kit注意事項:

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。

4、牢記樣本已經稀釋5倍,計算結果乘以5才是樣本實際濃度。

5、本試劑盒定量范圍為50-1600pg/mL,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結果,請用標準品稀釋液稀釋后測定準確結果(50-1600pg/mL范圍內),乘以總稀釋倍數即為樣本*終濃度。

6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。

7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。

8、試劑盒保質期內使用,不同批號的試劑不得混用。

9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
 

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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