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技術文獻

人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒使用說明書
閱讀次數:1802 發布時間:2017/8/7 9:40:17
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人腺苷脫氨酶(ADA)elisa試劑盒使用說明書由上海遠慕生物提供,本司專業經營進口/國產ELISA試劑盒,動物血清,培養基,抗體,實驗耗材,化學試劑標準品對照品" >標準品對照品,酶聯免疫試劑盒,白介素試劑盒,金標檢測試劑盒,提供ELISA試劑盒代測服務,ELISA種屬涵蓋大鼠,人,小鼠,植物,馬,魚,鴨,雞,兔,豬,犬,駱駝,牛及其他動物,歡迎來電咨詢!

中文名:人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒

別名:人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA Kit

供應商:上海遠慕

保存條件:2-8℃
 
有效期:6個月

試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。

產品特點:是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢

可檢測指標:炎癥因子,血管生成素,趨化因子,生長因子等。
 
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測試劑盒


ELISA試劑盒試劑準備:

試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。


人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA檢測試劑盒組織結構:

1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

3、 細胞上清液:1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘,取上清液。

5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒使用說明書 若干特點:

專一性強:抗原與抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

靈敏度高:由于抗體聯結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存:經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定,因此有利于樣品的保存。


人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒操作步驟:

1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

2、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。

7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
 
人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒說明書


人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒使用說明書
注意事項:

1. 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。


ELISA試劑盒實驗洗板方法:

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據需要,重復此過程數次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。


人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒性能:

1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2. 靈敏度:檢測濃度小于(參考說明書)

3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

6. 有效期:6個月。

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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