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技術文獻

上海遠慕分享:無蛋白血濾液制備實驗
閱讀次數:3064 發布時間:2017/7/31 15:43:46
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上海遠慕分享:無蛋白血濾液制備實驗


    鎢酸法

    實驗原理:鎢酸鈉與硫酸混合,生成鎢酸,鎢酸可以與血液中蛋白質結合生成蛋白質鹽沉淀,經離心將蛋白質除掉。

    三氯醋酸法

    實驗原理:血液中蛋白質能與三氧醋酸作用于生成不溶性的蛋白質鹽沉淀,經離心將蛋白質除去,上清液為無蛋白血濾液。

    實驗步驟

    一、鎢酸法

    實驗試劑:

    1. 100g/L鎢酸鈉溶液:稱取鎢酸鈉100g,溶于水中加水至1000ml

    2. 1/3M硫酸:取己標定的當量硫酸2份加水1份混合。

    實驗操作:

    用吸管將全血緩慢放入蒸餾水中,每次加入試劑后充分混勻,靜止10分鐘后離心,取上清液備用。

    二、三氯醋酸法

    實驗試劑:100 g/L三氯醋酸溶液

    實驗操作:取血清或血漿一份,三氯醋酸9份,加入血清或血漿中(邊加邊搖)。充分混勻后離心,取上法備用。


    注意事項

    一、鎢酸法

    1. 抗凝血中草酸鹽過剩時,蛋白質沉淀不完全,沉淀不能變為暗褐色,此時可滴加100g/L硫酸一滴,搖勻,至沉淀變為暗褐色再進行過濾。

    2. 除蛋白濾液不透明時,應將蛋白質沉淀及濾液傾回試管,按1所示方法加人硫酸,使蛋白質完全沉淀。

    3. 此濾液適于葡萄糖、肌酐、肌酸、尿酸等測定。

    二、三氯醋酸法

    1. 此法所得濾液量多,酸性較強,適于較強酸性溶解的物質定測定,如鈣。 磷等。

    2. 不適于堿性還原法血糖定量測定。

    3. 三氯醋酸易潮解,注意保存。

原創作者:上海遠慕生物科技有限公司

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