一、培養箱環境污染
很多實驗室培養霉菌采用的是用的霉菌培養箱，所以培養箱空間里會有大量的霉菌孢子。而平皿的蓋和底是有一定縫隙的，尤其是玻璃平皿縫隙還是比較大的，正置培養中，孢子會向上飛揚通過縫隙落到平板的培養基上，導致污染。細心地實驗猿可能發現，污染的菌落大部分都是在平皿邊緣生長的。用一次性塑料平皿來培養，污染的概率就會小很多，因為一次性塑料平皿的蓋和底之間的縫隙相比之下是比較小的。因此培養箱環境中的孢子可能會是主要污染源。
這樣一來，解決的方法就應該是對培養箱進行殺菌。可以考慮用紫外線殺一下菌，同時輔助消毒劑擦拭的方法，常用消毒劑比如75%酒精和新潔爾滅等，應該注意的是，這樣的殺菌操作也是需要經常進行的，因為霉菌的孢子是十分難清除的，而每次培養可能又會引進新的污染源，可以考慮每周進行兩次，保/證培養環境無污染源。
二、平皿冷凝水污染
正置培養過程中，若是平皿的上蓋有泠凝水，在培養過程中冷凝水滴落到培養基上，也容易造成菌落蔓延，平皿污染。因此在培養之，一定要保/證平皿干燥，可以把平皿放在37℃的環境里烘干，烘干之后再進行培養，就會避免這個原因造成的污染。
三、操作環境和培養基的污染
因為無菌室里可能也會因為滅菌效果不理想造成污染。小編之工作的實驗室，操作臺使用紫外線滅菌，經常就會滅菌不徹/底有孢子污染，尤其是在進行過霉菌的相關檢測之后。所以在進行過霉菌檢測之后，適當的增長滅菌時間，可能會達到比較理想的效果。另外，為了徹/底解決無菌室空間孢子污染的問題，可以購買安裝臭氧發生器，通過紫外線+臭氧的雙重消毒模式，效果就十分理想了。
大家如果還是想驗證一下究竟是什么原因造成的污染，這里提供一個簡單的驗證試驗：在正常檢測的環境中倒一組空白平皿，將這些平皿分為AB兩組，其中A組用有充足氧氣的自封袋將平皿封好，B組不封，均放置在培養箱中正置培養。若是A組B組均有霉菌生長，則需要考慮培養基污染或者操作環境的污染；若是A組不生長霉菌而B組生長，則需要考慮是培養箱內的環境污染。通過這個小試驗，可以基本上確定污染源，然后針對污染源進行相應的處理。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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