技術文獻
一、用途
本產品主要適用于組織切片及脫落細胞染色。
二、原理
核酸等電點為PH1.5-2.0,當PH＞2.0時，能結合帶正電荷的蘇木素。染料中的伊紅、亮綠、橙黃等為酸性染料，俾士麥棕為鹽基性染料，能與細胞漿中相反電荷的蛋白質結合，從而染出鮮艷的結構。
三、試劑盒組成
①、 蘇木素染色液：1×250ml； ②、5%鹽酸液：1×25ml；
③、飽和碳酸鋰：1×5ml； ④、橙黃G-6染色液：1×250ml；
⑤、亮綠染色液：1×100ml； ⑥、俾士麥棕染色液：1× 22ml；
⑦、伊紅染色液：1×100ml； ⑧、5%磷鎢酸：1× 10ml。
用戶須自備95%酒精、無水酒精、二甲苯、樹膠。
EA-36染色液配制：臨用前將亮綠染色液100ml、俾士麥棕染色液22ml、伊紅染色液100ml混勻，邊攪拌邊加入5%磷鎢酸10ml，充分混勻后即為EA-36染色液。注意：此液配成后*佳使用期為1－2個月，每次使用亦應攪拌均勻。
0.5%稀鹽酸液配制：取5%鹽酸液25ml加水至250ml, 混勻即可。
稀碳酸鋰液配制：在250 ml蒸餾水中加入飽和碳酸鋰6滴，混勻即可。
梯度酒精液配制：80%酒精液：95%酒精84 ml、蒸餾水16 ml混勻；
70%酒精液：95%酒精74 ml、蒸餾水26 ml混勻；
50%酒精液：95%酒精53 ml、蒸餾水47 ml混勻。
四、染色方法
1、將未干的涂片置95%酒精中，固定15－30分鐘。
2、加水：將已固定的涂片依次置80%、70%、50%酒精、蒸餾水中各1分鐘。
3、染核：置蘇木素染色液中2－10分鐘（視溫度酌情調整），蒸餾水沖凈。
4、分色：置0.5%稀鹽酸液中數秒，以涂片轉成淡紅色為度，立即以蒸餾水沖凈。
5、藍化：置稀碳酸鋰液中約1分鐘，以涂片轉成藍色為度，以蒸餾水沖凈。
6、脫水：依次置50%、70%、80%酒精液中半分鐘，再置95%酒精液中2分鐘。
7、染漿：置橙黃G-6染色液中2分鐘，再置95%酒精液中迅速洗滌2－3次，以去掉多余的橙黃G-6。
8、再染漿：置EA-36染色液中2－5分鐘，再置兩缸95%酒精液中分別洗滌1－2次。
9、去水：置兩缸無水酒精中分別洗滌1－2次。
10、透明：置兩缸二甲苯中分別洗滌1－2次。
11、封片：用樹膠封固涂片。若不需保存標本，此步可略。
五、結果
上皮細胞：核染藍紫色，核仁紅色，胞漿依分化高低，分別染成橙黃、粉紅、綠色、淡藍色。
六、貯存、有效期
本試劑盒應置2－25℃、相對濕度40－75%處避光保存,有效期一年。
原創作者：上海遠慕生物科技有限公司
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